Сейчас Вы просматриваете категорию - Разное. Вы можете скачать - Как извлечь ДНК из фруктов бесплатно без регистрации. Если вам понравилась новость - Как извлечь ДНК из фруктов, добавьте эту страницу в закладки.
Этим вы поможете развитию и продвижению сайта!
В последние годы это не редкость, чтобы прочитать статьи на ДНК как в научно-популярных журналов. ДНК регулярно упоминали в новостях и часто признакам в детективном телевизору или на месте преступления расследование драмы. ДНК, также известного как дезоксирибонуклеиновая кислота, является длинной молекуле, которая содержит генетическую информацию для всех живых существ, будь то растительного, животного или простые микроорганизмы. Она способна копировать себе и может синтезировать РНК (рибонуклеиновая кислота). В более развитых и сложных форм жизни, ДНК содержится в ядре клетки. За исключением эритроцитов млекопитающих, которые лишены ядер, все клетки живого существа имеют свой собственный ДНК. Клетки организма используют определенные части молекулы ДНК, или генов, производить белки, необходимые для функционирования. Для более подробного описания ДНК, включая ее структуру, ее функции и механизм, посредством которого белки производятся, читателю следует обратиться к текстам перечисленных [1] Справочный раздел этого документа, который хорошо написаны и содержать отличными иллюстрациями. В этой статье я опишу простой эксперимент, который позволит вам извлечь немного ДНК из бананов, однако, вы можете попробовать его, используя другие фрукты и даже овощи. Это эксперимент, который может быть выполнен как дома, так и в школьной лаборатории.
ПОРЯДОК
РЕЗЮМЕ ПОРЯДОК Описанная ниже процедура использует тот факт, что внешние мембраны клеток и их ядер состоят из жировых веществ, что может быть разбита с помощью простого моющего средства. Первая операция в этой процедуре является распад фруктов в мякоть или кашу, так что клетки отделяются друг от друга как можно больше тем самым подвергая их действию моющих средств. Во-вторых, моющие средства добавляют мякоть фруктов, чтобы освободить ДНК из клеточных мембран, которые инкапсулируют его. В-третьих, необходимо, чтобы фильтры для разделения смеси нуклеиновой кислоты из остатков клеточных мембран. Наконец, ДНК осаждают в спирте, где он становится видимым. ДНК, вы получите с помощью этой процедуры можно наблюдать с помощью микроскопа и может быть использован для других экспериментов, как электрофорез или иным опытам.
ПРЕДВАРИТЕЛЬНЫЕ ОПЕРАЦИИ
МАТЕРИАЛЫ - Котел; - Термометр; - Пластиковая миска салата; - Кубики льда; - 50 см 70 - 95% 70-95% изопропилового или денатурированный спирт (этанол) в закрытой бутылке; - Тряпки и абсорбирующие ткани бумаги.
МЕТОД - За день до эксперимента, подготовить несколько кубиков льда; - По крайней мере за 2 часа до места в морозильной камере запечатанных пара-плотные пластиковые бутылки с 50 мл 70-95% изопропилового или этилового денатурированного спирта. Этот контейнер должны быть плотно закрыты, чтобы предотвратить паров алкоголя от освобождения, так как они легко воспламеняются; - 15 минут до начала процедуры, теплый горшок с водопроводной водой до 60 ° С;
Рисунок 2 - Перед началом эксперимента, важно для выполнения предварительных операций, описанных здесь.
Как упоминалось ранее, ДНК проходит внутри ядра клетки плода мы используем. Чтобы освободить ДНК, то это будет необходимо пробоя мембран клеток, а также тех из ядер. Поскольку эти мембраны состоят из фосфолипидов, которые являются молекулы, богатые жирами, мы будем распускать их, используя простой бытовое моющее средство. Мы также будем использовать немного поваренной соли, которая способствует выведению белков, называемых гистонов, на которых ДНК упаковке.
МАТЕРИАЛЫ - 100 мл дистиллированной воды, а водопроводная вода также может быть использован; - Шкала для взвешивания нескольких граммов (если возможно); - 3 г поваренной соли (половина чайной ложки); - 10 мл жидкого моющего средства; - 10 мл шприц без иглы; - 100 мл стакан; - Стеклянной палочкой.
МЕТОД - Залить 3 г соли и 80 мл дистиллированной воды в 100 мл стакан; - Соединение, пока соль полностью не растворится; - С шприц, взять 10 мл жидкого моющего средства и добавить его в раствор; - Добавить дистиллированной воды до получения общего объема 100 мл; - Не допуская при этом для получения пузырьков, смешайте с целью гомогенизации раствора; - Извлечение решение готово.
ПОДГОТОВКА МАССЫ
Эта операция служит для разделения клетки друг от друга и лучше подвергать их действию экстракционного раствора.
МАТЕРИАЛЫ - 100 г банана (или: киви, яблоко, груша, хаки, зеленый горошек, лук и др.); - Баланс; - Нож; - Разделочную доску и вилку; - 250 мл стакан; - Чайную ложку.
МЕТОД - Место 100 г банана (без кожуры) на разделочную доску и раздавить вилкой до получения целлюлозы. Если вы используете лук, с ножом получить кубики около 5 мм стороне или меньше. Вы можете также использовать раствор или блендере. Если это так, не кромсать целлюлозно слишком много; - Залить кашу в 250 мл стакан.
Рисунок 4 - Подготовка мякоти плодов.
ИЗВЛЕЧЕНИЯ ДНК
Целью данной операции является разрушение мембран клеток и их ядер, чтобы освободить ДНК. Целлюлозно будет нагревается до 60 ° С, чтобы ускорить и помочь процесс разрушения мембраны стены. Отопление целлюлозно также помогает отключить некоторые ферменты, как ДНКазы, что может привести к снижению ДНК. Однако, если пульпа проходит на повышенных температурах в течение слишком долгого времени ДНК может начать фрагмент дю для теплового воздействия. По этой причине рекомендуется, чтобы охладить целлюлозно примерно через 15 минут в ванне с холодной воды.
Рисунок 5 - Налейте экстракционного раствора в целлюлозно-микс.
Рисунок 6 - целлюлозно должны храниться при температуре 60 ° С в течение не более 15 минут, а затем охлаждают до 0 ° С в течение 5 минут.
МАТЕРИАЛЫ - Термометр; - Горшок с водой при температуре 60 ° С; - Салат миску с водой и кубиками льда.
МЕТОД - Налейте извлечения решение на кашу; - Место в стакане на водяной бане в кастрюлю с водой при температуре 60 ° С; - Смешайте кашу так, чтобы распространять извлечения решение и сделать температуры равномерное; - После 15 минут, место в стакане на водяной бане в воде с кубиками льда; - Смешайте кашу, чтобы температура равномерная; - Через 5 минут, снимите стакан с холодной водой и подготовить себя к фильтрации.
ФИЛЬТРАЦИЯ
Процесса фильтрации используется для сбора жидкости богаты ДНК и отделить его от сотовой остатков и других тканей плода, который будет отброшен.
МАТЕРИАЛЫ - Сито с диаметром около 12 см; - Кофе фильтровальную бумагу (лабораторные фильтр слишком толстый). Кухня фильтровальной бумаги ткани также могут быть использованы при условии, что она не имеет никаких видимых отверстий; - Чашу.
МЕТОД - Место решето на чашу; - Принимать фильтровальную бумагу, смочите ее и поместить его в решето; - Налить немного пульпы на фильтр, стараясь, чтобы это проходит через фильтровальную бумагу; - Смешайте с осторожностью, чтобы помочь фильтрации и избежать копирования фильтровальной бумаги; - Отфильтрованной жидкости вы получите богатый ДНК. Рисунок 7 - Фильтрация целлюлозы с использованием сит, фильтровальной бумагой и миску.
УДАЛЕНИЕ БЕЛКОВ (опционально)
С помощью этой дополнительной операции можно получить чистый экстракт ДНК, но это не существенно, если вы хотите наблюдать ДНК. Поскольку ДНК наматывается на белки, называемые гистоны это будет необходимо, чтобы удалить эти белки для получения ДНК-экстракта более высокой чистоты. Для удаления этих гистонов, вы можете использовать протеолитических ферментов, как протеазы. Хотя вы можете приобрести протеазы в магазин, который продает химических продуктов, вы также можете заменить его с веществом, которое намного легче найти, она находится в соке ананаса которые, которая содержит бромелайн, вещество, способное к разрушению белков в аминокислот, из которых они состоят.
Рисунок 8 - Получение ананасовый сок.
Рисунок 9 - В трубке, заливают 5 мл фильтрата и 1 мл ананасового сока.
МАТЕРИАЛЫ - Протеолитических ферментов (например: протеазы или ананасовый сок); - 5 мл шприца без иглы.
МЕТОД - В трубке, заливают 5 мл отфильтрованного раствора; - Добавить 1 мл ананасового сока и перемешать; - Ждать 2 - 3 минуты, чтобы на бромелайн реагировать.
Осаждения ДНК
ДНК вполне растворим в воде и невидимым, пока он не растворяется в спирте в котором она оседает и становится видимым. При добавлении спирта в раствор ДНК фильтрата в трубке, ДНК оказывается видимым.
Рисунок 10 - Очень медленно, налить ледяной алкоголя в
трубы и избежать смешивания спирта с фильтрата.
Рисунок 11 - труба с ДНК банана смешанный с многочисленными крошечными воздуха пузырьков освобождается от алкоголя, который разогревается. На рисунке 1, меньше пузырьков и ДНК наблюдается в виде молочно вещество.
МАТЕРИАЛЫ - Некоторые трубы для возможного повторения операции; - Трубы держателя; - Ледяным спиртом (хранится в морозильной камере).
МЕТОД - Медленно, залить в трубку предыдущем шаге некоторые ледяные алкоголь, избегая его смешать с фильтрата; - Объем спирта должен быть примерно такой же этого решения; - Пусть труба отдых на 5 минут, чтобы дать на ДНК, чтобы осадок и накапливаются в трубке.
Теперь, на границе между алкоголем и фильтрата вы должны быть в состоянии видеть молочно вещество, которое имеет тенденцию к увеличению объема с течением времени. Это молочно вещество ДНК банана. К сожалению, внутри этой молочно немного массы, вы можете наблюдать многочисленных мелких пузырьков. Присутствие этих пузырей связано с тем свойством, что растворимость газов в холодной жидкости выше, чем в теплое. Хотя алкоголь в морозильнике вероятным поглощается некоторые газы, выделяемые в качестве жидкости подогревается. Наблюдения через микроскоп (опционально)
МАТЕРИАЛЫ - Некоторые чистые слайды микроскопа; - Крюк сделал с длинной металлической проволоки; - Краситель для окраски ядра (например: Толуидин, метиленовый синий, ацетоацетил-Orcein); - Капельницы; - Микроскоп.
МЕТОД - С длинной металлической проволоки, оканчивающиеся на крючок, извлечь образцы ДНК из пробирки и поместите его на чистую слайд микроскопа; - Уровень массы на слайд и омрачит его с ядерной красителя; - При необходимости, добавить немного воды и смонтировать покровное.
Наблюдая этот препарат под микроскопом, не ожидал увидеть известных двойной структуры лестницы спирали ДНК. Вы не можете видеть это даже с электронным микроскопом. То, что вы видите, сгустки или стаи материал ДНК, которые выглядят как запутанные масса белка нити как показано на рисунке Рисунок 12.
Рисунок 12 - Пример банан ДНК при температуре около 100 X (Окрашивали 1% раствора толуидин).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Этот эксперимент был не так уж сложно осуществить в конце концов, не так ли?. Цель этой простой эксперимент, чтобы предоставить вам введение в процедуры, которые используются в молекулярной биологии. Часто методы, используемые в современных лабораториях микробиологии основаны на простых операциях, как этот. В других случаях процедуры могут быть весьма сложными и могут быть связаны с более сложными манипуляциями и оборудования. Во всех случаях, глубокими знаниями в области биологии и химии имеет важное значение для понимания того, как ДНК используется в области наук о жизни и науки о здоровье. Если этот эксперимент вызвал интерес в проведении будущих исследований, помните, что ресурсы, доступные через Интернет вы можете привести вас к новым областям открытие. Если вы хотите узнать больше, посмотрите на документ [2] в разделе Ссылки данной статьи. Извлечение ДНК является первым шагом на многих других увлекательных экспериментов.
Всего: 629 
Новых за месяц: 0 
Администраторов: 3 
Модераторов: 1
Модератор форума: 
Проверенных: 0 
Пользователей: 625 
Женщин: 505